Орындаған: Алдибаева А. Әбдірахман М


Максам Гилберт әдісіне түсінік

Loading...


бет4/8
Дата01.03.2021
өлшемі0.67 Mb.
1   2   3   4   5   6   7   8

Максам Гилберт әдісіне түсінік


Максам Гилберт пен Сэнгердің реттілігі-1970 жылдардың ортасында жасалған ДНҚ-ны ретке келтірудің екі дәстүрлі әдісі. Олар ДНҚ молекуласындағы нуклеотид негіздерін анықтауға жауап береді. Максам Гилберт секвенирлеу процедурасы төрт нуклеотид пен гель электрофорезінің әрқайсысында 5'терминалды таңбаланған ДНҚ фрагменттерін химиялық жолмен бөлу арқылы негіздердің реттілігін анықтайды. Сэнгер секвенирлеу процедурасы ДНҚ полимераза мен дидезоксинуклеотидтер мен гель электрофорезін қолдана отырып, бір ішекті ДНҚ синтезі арқылы нуклеотидтер тізбегін анықтайды. Бұл Максам Гилберт пен Сэнгер арасындағы басты айырмашылық.

Максам Гилберт секвенирациясы-1977-1980 жылдары Аллан Максам мен Уолтер Гилберт жасаған екі дәстүрлі ДНҚ секвенирлеу әдістерінің бірі.

Негізінен, бұл әдіс ДНҚ молекулаларын химиялық агенттермен терминалды таңбалауды, содан кейін төрт түрлі химиялық реакцияларда ДНҚ негіздерін өзгертуді қамтиды. Содан кейін ДНҚ модификацияланған A + G, G, C + T және C негіздерінің қосылу нүктесінде бөлінеді, содан кейін радиоактивті фрагменттер таңбаланған ұшынан нуклеотид негізіне дейін синтезделеді.



Әдістің барысы:
    • 1-ші кезеңде ДНҚ үлгісі, әдетте салыстырмалы түрде қысқа (100-1000 а.к.) біртекті фрагмент (мысалы, эндонуклеаздармен бөлінген плазмида электрофоретикалық бөлінгеннен кейін гельден «жолақты» кесіп алу арқылы алынған), бір шеті радиоактивті затбелгімен таңбаланған.
    • Содан кейін үлгіні төрт бөлікке бөледі, содан кейін бөліктердің әрқайсысы өзіндік реагентпен өңделеді, бұл белгілі бір негіздер үшін ДНҚ гидролизіне әкеледі (немесе негіздердің тіркесімдері). Әр реакцияның параметрлері гидролиз толығымен жүрмейтін етіп таңдалады(орта есеппен жеке молекулаға бір модификация алған жөн).
    • Нәтижесінде «берілген түрдегі нуклеотидтердің орналасуына сәйкес ұзындығы бойынша сәйкес келетін ДНҚ-ның үзінділері» жиынтығы алынады.


Достарыңызбен бөлісу:
1   2   3   4   5   6   7   8
Loading...




©melimde.com 2020
әкімшілігінің қараңыз

    Басты бет
Сабақтың тақырыбы
Сабақтың мақсаты
рсетілетін қызмет
Сабақ тақырыбы
Жалпы ережелер
қызмет стандарты
бойынша жиынтық
жиынтық бағалау
ғылым министрлігі
бекіту туралы
Әдістемелік кешені
туралы хабарландыру
тоқсан бойынша
Сабақ жоспары
бағалауға арналған
Қазақстан республикасы
жиынтық бағалаудың
тоқсанға арналған
Жұмыс бағдарламасы
біліктілік талаптары
әкімінің аппараты
арналған жиынтық
туралы анықтама
Қазақстан республикасының
білім беретін
республикасы білім
мамандығына арналған
қойылатын жалпы
Конкурс туралы
жалпы біліктілік
мемлекеттік әкімшілік
жиынтық бағалауға
бағалау тапсырмалары
арналған әдістемелік
Қазақстан тарихы
жалпы конкурс
қатысушыларға қойылатын
арналған тапсырмалар
бағалаудың тапсырмалары
мерзімді жоспар
Қазақ әдебиеті
пәнінен тоқсанға
әдістемелік кешені
Мектепке дейінгі
ортақ біліктілік
Қазақстан облысы
қызмет регламенті
ткізу туралы
конкурс қатысушыларына
біліктілік талаптар
мамандығы бойынша

Loading...