Лабораторный практикум по общей микробиологии

Loading...


бет8/20
Дата13.04.2020
өлшемі253.08 Kb.
1   ...   4   5   6   7   8   9   10   11   ...   20

Контрольные вопросы


  1. Что такое капсула, каковы ее химический состав, морфология и функции?

  2. Методы окраски бактериальных капсул.

  3. Методы окраски клеточной стенки.

  4. Окраска бактерий по Граму.

  5. Окраска бактерий для определения их кислотоустойчивости.

  6. Методы окраски нуклеоида у бактерий.

  7. Спорообразование у бактерий, строение спор, расположение в клетке и их функции.

  8. Окраска спор.
  1. КУЛЬТИВИРОВАНИЕ И ХРАНЕНИЕ МИКРООРГАНИЗМОВ. ВЫДЕЛЕНИЕ ЧИСТЫХ КУЛЬТУР МИКРООРГАНИЗМОВ

    1. Основные компоненты питательных сред


Культивирование микроорганизмов является одним из основных ме- тодов микробиологии. От умения культивировать микроорганизмы в лабо- раторных условиях в значительной степени зависят успехи их изучения и практического применения.

В лабораторных условиях микроорганизмы культивируют на пита- тельных средах, поэтому питательная среда должна содержать все вещест- ва, необходимые для их роста. Основными компонентами любой пита- тельной среды для культивирования микроорганизмов являются соедине- ния углерода и азота. По потребностям в углероде микроорганизмы при- нято делить на две большие группы - автотрофы и гетеротрофы.

Для развития гетеротрофных микроорганизмов среда должна содер- жать органические соединения в зависимости от их индивидуальных осо- бенностей: кислоты, спирты, углеводороды, ароматические соединения.

Вторым основным компонентом питательной среды является источ- ник азота. Питательные среды для культивирования некоторых микроор- ганизмов должны включать одну, несколько или полный набор аминокис- лот в концентрации от 0,1 до 0,05 г на 100 мл. Потребности микроорганиз- мов в некоторых аминокислотах часто удовлетворяют добавляя к среде гидролизат белка.

Многие микроорганизмы требуют наличия в среде факторов роста, к которым относятся витамины, пурины, пиримидины и аминокислоты. Что- бы подчеркнуть потребность микроорганизмов в факторах роста, принято использовать термины «прототрофы» и «ауксотрофы». Прототрофы не нуждаются в факторах роста, для ауксотрофов абсолютно необходимо на- личие в среде одного или нескольких факторов роста.

Примерами смесей, содержащих различные факторы роста, могут служить дрожжевой экстракт, дрожжевой автолизат, а также кукурузный экстракт. Дрожжевой экстракт вносят в среду для культивирования от 0,05 до 0,5 г на 100 мл, дрожжевой автолизат - в таком количестве, чтобы концентрация аминного азота составляла 5 - 30 мг на 100 мл среды.



32

По составу принято выделять естественные, или натуральные, сре- ды и синтетические среды.



Натуральными называют среды, в состав которых входят продукты животного или растительного происхождения. К таким средам относятся овощные или фруктовые соки, животные ткани, разведенная кровь, моло- ко, воды морей, озер и минеральных источников, отвары или экстракты, полученные из природных субстратов, таких как мясо, почва, навоз, раз- личные части растений, клетки микроорганизмов.

Натуральные среды используются главным образом для поддержа- ния культур микроорганизмов, накопления биомассы и для диагностиче- ских целей. К числу натуральных сред, широко применяемых в лаборатор- ной практике, относятся мясо-пептонный бульон, неохмеленное пивное сусло, дрожжевая и картофельная среды, почвенный экстракт.



Мясо-пептонный бульон (МПБ) представляет собой мясную воду, к которой добавляют 1% пептона и 0.5% NaCl. МПБ - богатая питательная среда, но она почти не содержит углеводов. В случае необходимости их добавляют к МПБ чаще всего в количестве 1 - 2 г на 100 мл. МПБ стери- лизуют при 1 атм.

Синтетические среды - это среды, в которые входят лишь соедине- ния определенного химического состава, взятые в точно указанных коли- чествах. Синтетические среды широко используют при исследовании об- мена веществ, физиологии и биохимии микроорганизмов, для разработки состава синтетических сред, обеспечивающих рост микроорганизмов или усиленный биосинтез какого-либо продукта жизнедеятельности. Синтети- ческие среды могут иметь относительно большой набор компонентов, но могут быть и довольно простыми по составу.

Наряду с натуральными и синтетическими средами выделяют так на- зываемые полусинтетические среды. Главными компонентами полу син- тетических сред являются соединения известного химического состава - углеводы, соли аммония или нитраты, фосфаты и т.д. Однако в их состав всегда включаются вещества неопределенного состава, такие как дрожже- вой автолизат, почвенный экстракт или гидролизат казеина. Эти среды на- ходят широкое применение в промышленной микробиологии для получе- ния аминокислот, витаминов, антибиотиков и других важных продуктов жизнедеятельности микроорганизмов.


    1. Дифференциально-диагностические (индикаторные) среды

Эти среды дают возможность быстро отличить одни виды бактерий от других или выявить некоторые их особенности. Примером индикатор- ной среды для выявления бактерий из группы кишечной палочки в естест- венных субстратах может служить агаризованная среда Эндо, в состав ко- торой включен 10%-ный спиртовый раствор основного фуксина. Бактерии рода Escherichia на этой среде образуют малиновые колонии с металличе- ским блеском.

Дифференциально-диагностические среды особенно широко приме- няются в санитарной и медицинской микробиологии для быстрой иденти- фикации определенных групп микроорганизмов.

По физическому состоянию различают жидкие, сыпучие и плотные среды. Жидкие среды широко применяются для накопления биомассы или продуктов обмена, исследования физиологии и биохимии микроорганиз- мов, а также поддержания и сохранения в коллекции культур микроорга- низмов. Сыпучие среды применяют главным образом в промышленной микробиологии для культивирования некоторых продуцентов физиологи- чески активных соединений, а также в коллекциях для сохранения культур микроорганизмов. К таким средам относятся, например, разваренное пше- но, отруби. Плотные среды используют для выделения чистых культур, в диагностических целях для описания колоний, определения количества микроорганизмов, их антибиотической активности, для хранения культур в коллекциях и в ряде других случаев. С целью уплотнения сред применяют желатину или агар.



Агар используют для уплотнения особенно часто. Он представляет собой сложный полисахарид, в состав которого входят агароза и агаропек- тин. Агар получают из некоторых морских водорослей и выпускают в виде пластин, стебельков или порошка. Агар удобен тем, что большинство мик- роорганизмов не используют его в качестве субстрата для роста. В воде он образует гель, который плавится примерно при 100 °С и затвердевает при 40 0С. Поэтому на агаризованных средах можно культивировать значи- тельную часть известных микроорганизмов. Чаще всего агар добавляют к средам в количестве 1,5 %. Если необходимо получить более влажную сре- ду, вносят 1,0 %, а более плотную и сухую - 2 - 3 % агара.


    1. Достарыңызбен бөлісу:
1   ...   4   5   6   7   8   9   10   11   ...   20
Loading...


©melimde.com 2020
әкімшілігінің қараңыз

    Басты бет
рсетілетін ызмет
Жалпы ережелер
ызмет стандарты
дістемелік кешені
бекіту туралы
туралы хабарландыру
біліктілік талаптары
кіміні аппараты
Конкурс туралы
жалпы біліктілік
ойылатын жалпы
мемлекеттік кімшілік
бойынша жиынты
жалпы конкурс
білім беретін
Барлы конкурс
республикасы білім
ызмет регламенті
ткізу туралы
конкурс атысушыларына
біліктілік талаптар
атысушыларына арнал
Республикасы кіметіні
идаларын бекіту
облысы кімдігіні
рсетілетін ызметтер
мемлекеттік ызмет
дістемелік сыныстар
Конкурс ткізу
стандарттарын бекіту
мемлекеттік мекемесі
Мектепке дейінгі
дебиеті маманды
дістемелік материалдар
білім беруді
жалпы білім
ауданы кіміні
конкурс туралы
мектепке дейінгі
рметті студент
облысы бойынша
мерзімді жоспар
мыссыз азаматтар
Мемлекеттік кірістер
Конкурс жариялайды
дарламасыны титулды
дістемелік кешен
ызметтер стандарттарын
разрядты спортшы
мелетке толма
директоры бдиев

Loading...