Лабораторный практикум по общей микробиологии

Loading...


бет15/20
Дата13.04.2020
өлшемі253.08 Kb.
1   ...   12   13   14   15   16   17   18   19   20

Контрольные вопросы


  1. Какие методы подсчета микробных клеток Вы знаете и каковы критерии выбора метода?

  2. Подсчет клеток в счетных камерах.

  3. Подсчет клеток на фиксированных окрашенных мазках.

  4. Определение числа клеток микроорганизмов высевом на пита тельные среды.

  5. Определение количества клеток и биомассы нефелометрическим методом.

  6. Стандарты мутности и их применение.
  1. КУЛЬТУРАЛЬНЫЕ И ФИЗИОЛОГО-БИОХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА МИКРООРГАНИЗМОВ

Характеристика культуральных и физиолого-биохимических особен- ностей микроорганизмов включает описание их способности расти на раз- ных питательных средах и вызывать определенные превращения веществ, входящих в состав этих сред.



    1. Рост на плотных питательных средах

На поверхности плотных питательных сред в зависимости от посева микроорганизмы могут расти в виде колонии, штриха или сплошного газо- на. Колонией называют изолированное скопление клеток одного вида, вы- росшее в большинстве случаев из одной клетки. При их описании учиты- вают следующие признаки:



  • форму колонии - округлая, амебовидная, неправильная, ризоидная и т. д.;

  • размер (диаметр) колонии, измеряют в миллиметрах; если размеры колонии не превышают 1 мм, то их называют точечными;

  • поверхность колонии - гладкая, шероховатая, бороздчатая, склад чатая, морщинистая, с концентрическими кругами или радиально исчер ченная;

  • профиль колонии - плоский, выпуклый, кратерообразный, конусо видный;

  • блеск и прозрачность - колония блестящая, матовая, тусклая, муч нистая, прозрачная;

  • цвет колонии - бесцветная (грязно-белые колонии относят к бес цветным) или пигментированная - белая, желтая, золотистая, оранжевая, сиреневая, красная, черная. Особо отмечают выделение пигмента в суб страт.

52
    1. Рост в жидких питательных средах

Характеризуя рост микроорганизмов в жидкой среде, отмечают сте- пень помутнения - слабая, умеренная или сильная, особенности пленки - тонкая, плотная или рыхлая, гладкая или складчатая, а при образовании осадка указывают, скудный он или обильный, плотный, рыхлый, слизи- стый или хлопьевидный. Нередко рост микроорганизмов сопровождается появлением запаха, пигментацией среды, выделением газа.



Крахмал-йодная реакция на нитриты основана на том, что нитри- ты в кислой среде окисляют йодистый цинк с выделением йода, присутст- вие которого обнаруживают с помощью крахмала. Для проведения реак- ции к капле культуральной жидкости добавляют каплю раствора, содер- жащего ZnCI2, KI и крахмал, и каплю раствора НСl. При наличии в среде нитритов появляется синее окрашивание.

Протеолитическая активность определяется наличием ферментов (протеазы), катализирующих расщепление белков на поли- и олигопепти- ды. Протеазы выделяются различными видами бацилл, актиномицетов, мицелиальных грибов и другими микроорганизмами. Активность внекле- точных протеаз определяют, используя в качестве субстрата желатину, ка- зеин или другие белки.

Определение чувствительности микроорганизмов к антибиоти- ческим веществам. Чувствительность микроорганизмов к антибиотикам удобно определять с помощью выпускаемых промышленностью бумаж- ных дисков, пропитанных определенными антибиотиками. Концентрация антибиотиков в дисках подобрана с таким расчетом, чтобы диаметры за- держки роста стандартных тест-организмов были 28-32 мм. Если иссле- дуемые микроорганизмы чувствительны к данным антибиотикам, то во- круг дисков образуются зоны отсутствия роста. Диаметр зоны измеряют миллиметровой линейкой. Зона более 30 мм свидетельствует о высокой чувствительности микроорганизма к антибиотику, а менее 12 мм - о сла- бой чувствительности.

Лабораторная работа № 21 Определение биохимических свойств Bacillus subtilis



Цель работы. Освоить методики проведения биохимических тестов

для определения ферментативных свойств и идентификации бактерий.



Материалы и оборудование. Чистая культура Bacillus subtilis в чашках Петри с МПА, бактериологические петли, спиртовки, стерильные пробирки, предметные стекла, перекись водорода, среды с моно-, ди-, по- лисахаридами и спиртами, содержащие индикаторы; пробирки с МПБ; пробирки с 2 - 3%-ной пептонной водой; растворы цистина и цистеина, лакмусовая бумага, пробирки с мясо-пептонной желатиной, системы инди- каторные бумажные (СИБ) для идентификации энтеробактерий, производ- ства Нижегородского предприятия бактерийных препаратов; стерильный физиологический раствор, термостат с температурой 37 0С.

Ход выполнения работы


  1. Ознакомьтесь с инструкцией, прилагаемой к системе индикатор ной бумажной (СИБ), для идентификации энтеробактерий и выберите с помощью преподавателя необходимый Вам набор тестов из этой системы.

  2. Разлейте стерильный физиологический раствор в стерильные пробирки по 0,3 мл (по две пробирки на один тест: одна контрольная, ин кубируется без бактерий, а вторая - опытная), внесите в ряд опытных про бирок одинаковое количество (одна петля агаровой культуры или 0,1 мл бульонной культуры) исследуемой культуры бактерий.

  3. В соответствии с инструкцией внесите в пробирки бумажные диски тестов и инкубируйте пробирки при температуре 37 0С в соответст вии с инструкцией.

  4. Засейте чистую культуру исследуемых бактерий бактериологиче ской петлей на среды с моно-, ди-, полисахаридами и спиртами, предос тавленные преподавателем, и инкубируйте их в течение 18 -24 ч при тем пературе 37 °С.

  5. Для определения каталазной активности на предметное стекло нанесите каплю 3%-ного раствора перекиси водорода, внесите в нее петлю исследуемой агаровой или бульонной культуры бактерий и тщательно пе ремешайте. При положительной реакции (наличии каталазы) перекись во дорода будет разлагаться с образованием воды и выделением кислорода в виде пузырьков.

54

  1. Через 24 ч внимательно просмотрите все контрольные и опытные пробирки с тестами СИБ и посевы на среды с сахарами и спиртами. Ре- зультаты определения ферментативных свойств Bacillus subtilis оформите в виде табл.6

Таблица 6

Ферментативные свойства Bacillus subtilis

Сахаролитические свойства

Протеолитические свойства

Наличие катал азы

Глюкоза

Лактоза

Маннит

Сорбит

Индол

H2S

NH3




















































Лабораторная работа № 22



Определение чувствительности микроорганизмов к антибиотикам Цель работы. Освоить постановку теста определения чувствитель-

ности микроорганизмов к антибиотикам.



Материалы и оборудование. Чистая культура бактерий в пробирках или чашках Петри с МПА, бактериологические петли, спиртовки, стериль- ные пробирки, предметные стекла, чашки Петри с МПА, бумажные диски, пропитанные антибиотиками, стерильный физиологический раствор, тер- мостат с температурой 37 0С.


Достарыңызбен бөлісу:
1   ...   12   13   14   15   16   17   18   19   20
Loading...


©melimde.com 2020
әкімшілігінің қараңыз

    Басты бет
рсетілетін ызмет
Жалпы ережелер
ызмет стандарты
дістемелік кешені
бекіту туралы
туралы хабарландыру
біліктілік талаптары
кіміні аппараты
Конкурс туралы
жалпы біліктілік
ойылатын жалпы
мемлекеттік кімшілік
бойынша жиынты
жалпы конкурс
білім беретін
Барлы конкурс
республикасы білім
ызмет регламенті
ткізу туралы
конкурс атысушыларына
біліктілік талаптар
атысушыларына арнал
Республикасы кіметіні
идаларын бекіту
облысы кімдігіні
рсетілетін ызметтер
мемлекеттік ызмет
дістемелік сыныстар
Конкурс ткізу
стандарттарын бекіту
мемлекеттік мекемесі
Мектепке дейінгі
дебиеті маманды
дістемелік материалдар
білім беруді
жалпы білім
ауданы кіміні
конкурс туралы
мектепке дейінгі
рметті студент
облысы бойынша
мерзімді жоспар
мыссыз азаматтар
Мемлекеттік кірістер
Конкурс жариялайды
дарламасыны титулды
дістемелік кешен
ызметтер стандарттарын
разрядты спортшы
мелетке толма
директоры бдиев

Loading...