Лабораторный практикум по общей микробиологии


Определение концентрации бактериальной суспензии высевом на плотные питательные среды

Loading...


бет14/20
Дата13.04.2020
өлшемі253.08 Kb.
1   ...   10   11   12   13   14   15   16   17   ...   20

Определение концентрации бактериальной суспензии высевом на плотные питательные среды



Цель работы. Освоить метод количественного учета микроорганиз- мов высевом на плотные питательные среды (метод Коха).

Материалы и оборудование. Бактериологические петли, спиртовка, стерильная дистиллированная вода, чистые культуры дрожжей, стерильные пипетки на 1 - 2 мл, МПА в чашках Петри, термостат с температурой 37 °С.

Ход выполнения работы


  1. Приготовьте последовательные 10-кратные разведения исходной суспензии дрожжей: 10-1, 10-2, 10-3, 10-4, 10-54,5 мл дистиллированной воды добавьте 0,5 мл суспензии дрожжей).

  2. Полученные разведения суспензии микроорганизмов тщательно перемешайте (встряхните) и высейте на поверхность агара в чашке Петри (в объеме 0,1 или 0,2 мл). Посев производите, начиная с наибольшего раз ведения (10-5).

  3. Равномерно распределите на поверхности агара высеянную сус пензию, медленно вращая чашки Петри, и оставьте их при комнатной тем пературе на 30 мин для адсорбции микробов на поверхности агара.

  4. Засеянные чашки Петри поместите в термостат с температурой 37 °С и инкубируйте 24 - 48 ч (в зависимости от вида микроорганизмов). После этого произведите учет выросших колоний. Учитывать необходимо те чашки, на которых число колоний находится в диапазоне от 10 до 150 и общее число подсчитанных колоний при высеве из данного разведения должно быть не менее 300. При соблюдении этих условий учет результа тов будет правильным.

  5. Результаты работы оформите в виде табл. 4.

Таблица 4

Определение концентрации бактериальной суспензии


Разве дение

Количество колоний,

выросших на чашке Петри



Среднее значение

а

Количество микроорганизмов в 1мл исследуемой суспензии

М

10-3










10-4










10-5










Лабораторная работа № 19



Определение концентрации бактериальной суспензии с использованием бактериального стандарта мутности



Цель работы. Освоить метод определения концентрации микроор- ганизмов по бактериальному стандарту мутности.

Материалы и оборудование. Бактериальные стандарты мутности на

5 и 10 единиц, спиртовка, стерильная дистиллированная вода, чистые культуры дрожжей, стерильные пипетки вместимостью 1 - 2 мл, стериль- ные пробирки.


Ход выполнения работы


  1. Ознакомьтесь с правилами пользования бактериальным стандар том мутности.

  2. Стерильной пипеткой отберите 1 мл исходной суспензии дрожжей в стерильный флакон или мерную колбу вместимостью 100 мл или более.

  3. В соответствии с правилами пользования бактериальным стан дартом мутности определите концентрацию суспензии.

  4. Запишите в тетрадь последовательность этапов определения кон центрации и результат, который Вы получили.

Лабораторная работа № 20



Количественный учет клеток дрожжей на фиксированных препаратах



Цель работы. Освоить метод определения концентрации микроор- ганизмов на фиксированных препаратах.

Материалы и оборудование. Предметные стекла, микроскоп, мил- лиметровая бумага, стерильный водный раствор агар-агара, бактериологи- ческие петли, 96%-ный спирт, фуксин или метиленовая синь, микропипет- ки, спиртовка, чистые культуры дрожжей, стерильные пипетки на 1 - 2 мл, стерильные пробирки.

Ход выполнения работы


  1. Приготовьте фиксированный препарат дрожжей (0,2 или 0,3 мл исследуемой суспензии нанесите микропипеткой на хорошо обезжиренное сухое предметное стекло, помещенное на миллиметровую бумагу с очер- ченной площадью в 4 или 6 см2, добавьте каплю стерильного 0,03%-ного водного раствора агар-агара, быстро перемешайте стерильной бактериоло- гической петлей и равномерно распределите на площади отмеченной на бумаге, высушите мазок на воздухе, зафиксируйте 96%-ным спиртом в те- чение 20-30 мин).

  2. Окрасьте полученный препарат основным фуксином или метиле- новым синим в течение 2 мин и промойте его, погружая в воду и меняя во ду до тех пор, пока после очередного погружения вода не останется бес цветной. Высушите препарат на воздухе.

  3. Клетки подсчитывайте с иммерсионным объективом в квадратах окулярной сетки (не менее 10 полей зрения), передвигая препарат по диа гонали.

  4. Рассчитайте среднее количество клеток в квадрате сетки (поле зрения).

  5. Результаты работы оформите с виде табл. 5.

Таблица 5
Количественный учет клеток дрожжей на фиксированных препаратах



Разведение

Количество клеток в квадрате сетки (поле

зрения)


Число клеток

Количество клеток в ис- ходном об- разце

Общее

Среднее

0













1













2













3

















Достарыңызбен бөлісу:
1   ...   10   11   12   13   14   15   16   17   ...   20
Loading...


©melimde.com 2020
әкімшілігінің қараңыз

    Басты бет
рсетілетін ызмет
Жалпы ережелер
ызмет стандарты
дістемелік кешені
бекіту туралы
туралы хабарландыру
біліктілік талаптары
кіміні аппараты
Конкурс туралы
жалпы біліктілік
ойылатын жалпы
мемлекеттік кімшілік
бойынша жиынты
жалпы конкурс
білім беретін
Барлы конкурс
республикасы білім
ызмет регламенті
ткізу туралы
конкурс атысушыларына
біліктілік талаптар
атысушыларына арнал
Республикасы кіметіні
идаларын бекіту
облысы кімдігіні
рсетілетін ызметтер
мемлекеттік ызмет
дістемелік сыныстар
Конкурс ткізу
стандарттарын бекіту
мемлекеттік мекемесі
Мектепке дейінгі
дебиеті маманды
дістемелік материалдар
білім беруді
жалпы білім
ауданы кіміні
конкурс туралы
мектепке дейінгі
рметті студент
облысы бойынша
мерзімді жоспар
мыссыз азаматтар
Мемлекеттік кірістер
Конкурс жариялайды
дарламасыны титулды
дістемелік кешен
ызметтер стандарттарын
разрядты спортшы
мелетке толма
директоры бдиев

Loading...